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影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）携手蜘蛛格温（海莉·斯坦菲尔德 Hailee Steinfeld 配音），穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命，迈尔斯誓言打破命运魔咒，找到属于自己的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099（奥斯卡·伊萨克 Oscar Is aac 配音）所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突，一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响！
由沙梅克·摩尔,海莉·斯坦菲尔德,奥斯卡·伊萨克,杰克·约翰逊,伊萨·雷,詹森·舒瓦兹曼,马赫沙拉·阿里,布莱恩·泰里·亨利,劳伦·维勒斯,丹尼尔·卡卢亚,卡兰·索尼,安迪·萨姆伯格,乔玛·塔科内,唐纳德·格洛弗,谢伊·惠格姆,阿曼德拉·斯坦伯格 ,瑞秋·德拉彻,佩吉·陆,安德鲁·加菲尔德,佐伊·克罗维兹,约翰·木兰尼,贵美子·格伦,克里斯·派恩等主演。